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HUH7.5人肝癌細胞系
【細胞縮寫】 HuH-7細胞
【細胞名稱】 HuH-7(人肝癌細胞)
【背景資料】 據(jù)說產(chǎn)甲胎蛋白，胰酶α抗體，血漿銅藍蛋白，纖維蛋白原，纖維粘連蛋白等。
【細胞消化時注意把握消化時間，消化不夠會導(dǎo)致吹打細胞時造成損傷，一般消化時間是2-3分鐘，但以鏡檢時大部分細胞縮回球形為準，一般2次即可將細胞吹打下來，消化不夠進行細胞吹打易損傷細胞。細胞系的凍存液配方：90%FBS+10%DMSO，貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系
【代次】 P4
【規(guī)格】 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管（兩支）
【細胞數(shù)】 1*10（6）
【生物安全級別】 1
【生物體】 人
【組織來源】 肝
【細胞形態(tài)】 上皮細胞樣
【細胞特性】 貼壁
【特別注意：如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)，貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)，如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決】
【細胞】 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
【培養(yǎng)條件】 詳見細胞說明書
【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次
【凍存條件】 詳見細胞說明書
【主要文獻】 請具體查閱相關(guān)發(fā)表文章
HUH7.5人肝癌細胞系
傳代操作步驟：
一、貼壁細胞傳代
1.提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)。
2.吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞。
3.加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用。
4.胞用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ?，避免產(chǎn)生大量的氣泡。
5.將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
二、懸浮細胞傳代
1.將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min。
2.棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液。
3.將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)的過程中，經(jīng)常見到黑色的顆?；蛐『邳c，這種情況是怎么引起的呢？該怎么避免呢？原因：
黑點，大概有細胞本身帶的，環(huán)境有的，還有人身上帶進細胞間的,還有就是血清和培養(yǎng)基
1、如果小黑點有增殖趨勢，那么就有可能是污染了，需要處理；
2、如果小黑點沒有增殖趨勢，且不影響細胞生長，也不影響實驗的話，則可能
a、是“黑膠蟲”，黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物，本身就存在爭議。有人認為是從血清中來的一種原蟲，也有人認為是細菌，或是真菌，也有人認為是血清中的蛋白的結(jié)晶。“黑膠蟲”可寄生于動物細胞，也可以生存于培養(yǎng)基中，依靠細胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生，并隨細胞傳代而傳代。“黑膠蟲”與細胞競爭性生長，開始時對細胞并沒有什么影響，但當黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時候， 細胞生長就會受到影響直至死亡，嚴重影響了科研活動的開展和進行。以前（這個至少是10年以前），很多實驗室在養(yǎng)細胞時用國產(chǎn)血清，那時的血清可能質(zhì)量不過關(guān)，有所謂的“黑膠蟲”，但是也沒有明確的鑒定。但是現(xiàn)在的血清，即使國產(chǎn)的，產(chǎn)品里這種現(xiàn)象就少見了。
b、是細胞碎片，或血清里德沉淀析出，在做布朗運動。
c、是核糖體，也可能是雜質(zhì)ZYC3153 人腎母細胞瘤細胞 SK-NEP-1 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3154 人腎透明細胞腺癌細胞 786-O [786-0] 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3155 人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞 Caki-1 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3156 人腎細胞腺癌細胞 ACHN 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3157 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞 HEC-1-A 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3158 人絨毛膜癌細胞 JEG-3 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3159 人臍靜脈細胞融合細胞 EA.ZY926 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3160 人膀胱癌細胞 5637 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3161 人輸尿管上皮永生化細胞 SV-HUC-1 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3162 人滑膜肉瘤細胞 SW 982 [SW-982, SW982] 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3163 人膀胱移行細胞癌細胞 T24 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3164 人T淋巴細胞白血病細胞 HuT 78 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3165 人結(jié)直腸腺癌細胞 COLO 320DM 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
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