EOL-1人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：EoL-1 cellS

中文名稱：人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血??；人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株

代數(shù)：第四代

運(yùn)輸方式：復(fù)蘇活細(xì)胞或凍存細(xì)胞

細(xì)胞數(shù)量：5*100000個(gè)

貨期：復(fù)蘇細(xì)胞10個(gè)工作日，凍存細(xì)胞2-3個(gè)工作日

EoL-1細(xì)胞，人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株比較嬌貴，養(yǎng)它如同養(yǎng)孩子，EoL-1細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（細(xì)胞培養(yǎng)、培養(yǎng)基、胎牛血清、細(xì)胞活化與復(fù)蘇）更多詳細(xì)信息，請(qǐng)客服：！

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XC上皮細(xì)胞大鼠肉瘤MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA

LLC-WRC 256上皮細(xì)胞大鼠癌199培養(yǎng)基, 5% 馬血清

Jensen成纖維細(xì)胞大鼠肉瘤McCoy"s 5A, 5% 胎牛血清

Rat2(TK-)成纖維細(xì)胞樣大鼠Rat2(TK-)克隆衍生DMEM, 5% 胎牛血清,30μg/ml BrdU

PC12NGF誘導(dǎo)的神經(jīng)表型細(xì)胞大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞RPMI-1640, 10% 胎牛血清

L6大鼠大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞DMEM, 10% 胎牛血清

D-17上皮細(xì)胞狗骨肉瘤MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA

BT成纖維細(xì)胞牛鼻甲骨細(xì)胞MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA

MARC-145 猴猴腎MEM或DMEM, 10%小牛血清

RAMOS細(xì)胞，人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞株 RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS　

RS4：11細(xì)胞，人急性淋巴白血病細(xì)胞株1640培養(yǎng)基+10% FBS

EOL-1細(xì)胞，人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株

Sum275細(xì)胞，

NB-1細(xì)胞，人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株

NCI-2228 細(xì)胞，人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株40培養(yǎng)基+10% FBS

MOLM-13細(xì)胞，人急性髓性白血病細(xì)胞株GIBCO(1640+10%胎牛血清)

MOLM-14細(xì)胞，人急性髓性白血病細(xì)胞株GIBCO(1640+10%胎牛血清)

NCI-H522 細(xì)胞，人肺癌細(xì)胞細(xì)胞株1640培養(yǎng)基+10% FBS

CV-1成纖維細(xì)胞猴非洲綠猴腎MEM, 10% 胎牛血清

COS-1成纖維細(xì)胞猴腎MEM, 10% 胎牛血清

COS-3成纖維細(xì)胞猴腎MEM, 10% 胎牛血清

COS-7成纖維細(xì)胞猴非洲綠猴腎MEM, 10% 胎牛血清

Vero成纖維細(xì)胞猴非洲綠猴腎199培養(yǎng)基，5% 胎牛血清

B95-8成淋樣絨猴EB病毒感染的白血病細(xì)胞RPMI-1640, 10% 胎牛血清

CRFK上皮細(xì)胞貓腎MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA

293 成纖維細(xì)胞 人胚胎腎 MEM, 10% 熱滅活馬血清

IMR-90成纖維細(xì)胞 人肺MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA

W1-38成纖維細(xì)胞 人胚胎肺,3月妊娠MEM, 10% 胎牛血清

A549上皮細(xì)胞人肺癌F-12K, 10%胎牛血清

A431上皮型人表皮細(xì)胞癌DMEM, 10% 胎牛血清

BHL-100上皮細(xì)胞人乳房McCoy"5A, 10% 胎牛血清

BeWo上皮滋養(yǎng)層人絨毛癌F-12K, 15%胎牛血清

Caco-2上皮細(xì)胞人結(jié)腸腺癌MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA

Chang上皮細(xì)胞人肝臟BME, 10% 小牛血清

HCT-15上皮細(xì)胞人結(jié)腸直腸腺癌RPMI-1640, 10% 胎牛血清

HeLa上皮細(xì)胞人子宮頸癌MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA(in suspension, S-MEM)

HEp-G2上皮細(xì)胞人肝細(xì)胞癌MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAA

HEp-2上皮細(xì)胞人喉癌MEM, 10% 胎牛血清;或RPMI-1640, 10% 胎牛血清

HT-1080上皮細(xì)胞人纖維肉瘤MEM, 10% HI 胎牛血清 和 NEAA

HT-29上皮細(xì)胞人結(jié)腸腺癌McCoy"5A, 10% 胎牛血清

JEG-2上皮細(xì)胞人絨毛膜癌MEM, 10% 胎牛血清

MCF7上皮細(xì)胞人乳腺癌MEM, 10% 胎牛血清 NEAA, 10ug/ml 胰島素(insulin)

KB上皮細(xì)胞人口腔癌MEM, 10% 胎牛血清和NEAA

Saos-2上皮細(xì)胞人骨肉瘤McCoy"5A, 15% 胎牛血清

WI-38上皮細(xì)胞人胚胎肺BME, 10% 胎牛血清

WISH上皮細(xì)胞人羊膜BME, 10% 胎牛血清

WS1 人胚胎皮膚MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA

HUVEC內(nèi)皮細(xì)胞人臍帶F-12K, 10% 胎牛血清 和 肝素鹽 100 ug/ml

EB-3淋巴樣人Burkitt淋巴瘤RPMI-1640, 10% 胎牛血清

Raji淋巴樣人Burkitt淋巴瘤RPMI-1640, 10% 胎牛血清

IM-9成淋巴細(xì)胞人骨髓瘤病人骨髓RPMI-1640, 10% 胎牛血清

Daudi成淋巴細(xì)胞人 淋巴瘤病人血液RPMI-1640, 10% 胎牛血清

H9成淋巴細(xì)胞人 T細(xì)胞淋巴瘤RPMI-1640, 20% 胎牛血清

HL-60成淋巴細(xì)胞人 早幼粒細(xì)胞白血病RPMI-1640, 20% 胎牛血清

Jurkat成淋巴細(xì)胞人 T細(xì)胞白血病RPMI-1640, 10% 胎牛血清

K-562成淋巴細(xì)胞人 骨髓性的白血病RPMI-1640, 10% 胎牛血清

U937淋巴樣人 組織細(xì)胞淋巴瘤RPMI-1640, 10% 胎牛血清

KG-1骨髓白細(xì)胞人紅白血病病人骨髓IMDM, 20% 胎牛血清

McCoy成纖維細(xì)胞小鼠未知MEM, 10% 胎牛血清

BALB/3T3成纖維細(xì)胞小鼠胚胎DMEM, 10% 胎牛血清

3T6成纖維細(xì)胞小鼠胚胎DMEM, 10% 胎牛血清

A9成纖維細(xì)胞小鼠結(jié)締組織DMEM+10% 胎牛血清+6-硫鳥(niǎo)嘌呤（30μg/ml）+2,6-二氨基嘌呤（30μg/ml）

AtT-20上皮細(xì)胞小鼠垂體腫瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清

Clone M-3上皮細(xì)胞小鼠黑素瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清

I-10 上皮細(xì)胞小鼠睪丸癌 F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清

Y-1上皮細(xì)胞小鼠腎上腺瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清

WEHI-3b類巨噬細(xì)胞小鼠骨髓單核細(xì)胞白血病DMEM, 10% 胎牛血清

ES-D3胚胎型小鼠多能胚胎干細(xì)胞DMEM+ 15% 胎牛血清+100μmol/L 2-巰基丙醇

F9胚胎型至內(nèi)胚層小鼠睪丸畸胎癌DMEM, 15% 胎牛血清

BHK-21成纖維細(xì)胞倉(cāng)鼠腎GMEM, 10% 胎牛血清 或MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA

HaK上皮細(xì)胞倉(cāng)鼠腎BME, 10% 小牛血清

CHO-K1上皮細(xì)胞倉(cāng)鼠卵巢F-12, 10%胎牛血清

AR42J.大鼠胰腺腫瘤Ham"sF-12K, 20%胎牛血清

BRL3A.大鼠肝Coon"sF-12K, 5%胎牛血清

Clone 9上皮細(xì)胞大鼠肝臟F-12K, 10%胎牛血清

H4--Ⅱ-E-C3上皮樣大鼠肝癌F-12K, 10%胎牛血清`

GH1上皮細(xì)胞大鼠垂體腫瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清

GH3上皮細(xì)胞大鼠垂體腫瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清

IEC-6上皮樣大鼠正常小腸DMEM, 5% 胎牛血清,胰島素(insulin)0.1μg/ml

L2上皮細(xì)胞大鼠肺F-12K, 10%胎牛血清

收到細(xì)胞株包裹時(shí)， 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形， 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開(kāi)始培養(yǎng)， 或立即冷凍保存(置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2)。細(xì)胞復(fù)蘇的原則－快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。

EOL-1人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞

操作步驟：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

 2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
     1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
     2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。     
     3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
     4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
    1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
    2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
    3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

注意事項(xiàng)：
1.動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因。
3.有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措。
3.要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，細(xì)胞房的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)。
4.個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，zui近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟。
5.細(xì)胞房不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。